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多年 CCK-8 经验总结请收好,这些坑不要再跳了
来源: | 作者:advertising-100 | 发布时间: 2022-10-27 | 151 次浏览 | 分享到:

摘要:

在细胞培养实验过程中,大家是不是总会好奇别人家的实验总是做的又快又好,而自己做的实验又慢又难得做出自己满意的结果,搞得一天到晚也挺忙的,心想:我也很努力很认真啊,为啥效率总提不起来呢?


其实,有时候并不是自己不努力,只是没有找对方法。做实验可不能光是埋头苦干,还要学会运用合适的检测试剂盒,这样就能事半功倍。


如果你还在用 MTT,那就真的OUT了,MTT花4h才能得到的结果用 CCK-8 只需1h,CCK-8 可用于细胞增殖和毒性分析,同 MTT 法相比,CCK-8 即开即用,检测时间大概在 1 h 左右。


不仅如此,CCK-8 对细胞的毒性极小,完全可以测完细胞增殖或药物毒性后再继续用细胞进行下游实验。下面小编就来为大家介绍一下CCK-8 的具体情况。



CCK-8基本原理



基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。

图1. WST-8检测原理图 (EC=electron coupling reagent,即电子耦合试剂)


图2. CCK-8检测细胞活性原理图